Микроскопический метод диагностики онихомикозов.
Содержание
Введение
- Актуальность исследования, обоснование выбора темы
- Цель и задачи дипломной работы
- Определение объекта и предмета исследования
- Методологическая база и используемые методы
Глава 1. Теоретико-методологические основы охниомикозов
- 1.1 "Характеристика основных возбудителей охниомикозов"
- Биологические и таксономические особенности патогенов
- Молекулярно-генетические аспекты исследования возбудителей
- 1.2 Клинические и эпидемиологические характеристики "Охниомикозов"
- Клиническая симптоматика и патогенетические механизмы
- Эпидемиологическая динамика и пути передачи инфекции
Глава 2. Методологические подходы к диагностике охниомикозов
- 2.1 "Лабораторная диагностика охниомикозов": современные методы и практические приемы
- Применение микробиологических и серологических методов
- Использование молекулярно-биологических методик в клинической практике
- 2.2 "Протокол исследования и анализ полученных данных"
- Стандартизация протоколов и контроль качества исследования
- Интерпретация лабораторных показателей и корреляция с клиническими данными
Заключение
- Обобщение результатов исследования
- Практическая значимость и перспективы дальнейших разработок
Выводы
Список литературы
Приложения
Для определения продуктов полимеразной цепной реакции (ПЦР) применяется метод электрофореза в агарозном геле. При этом образцы ДНК, включенные в гель, окрашиваются этидием бромидом, который, вступая в реакцию с нуклеиновыми кислотами, обеспечивает их яркое свечение при воздействии УФ-излучения. Если фрагменты ДНК, специфичные к выбранным праймерам, присутствуют в образце, они становятся отчетливо видимыми, что является индикатором положительного результата теста. Высокая чувствительность метода — возможность обнаружить порядка 1000 копий ДНК на 1 мл исследуемой жидкости, его точность и относительная быстрота получения результатов подчеркивают преимущества данного подхода [5, 40].
В рамках исследования, проведенного на базе ________________________, была изучена группа из 30 пациентов, диагностированных с онихомикозом ногтей стоп. Выборка включала представителей обоих полов, а возраст пациентов варьировался от 20 до 70 лет. Основной протокол исследования предусматривал сбор данных о пациенте, уточнение таких параметров, как возраст, пол и продолжительность течения заболевания, а также применение лабораторных методов, включающих микроскопический анализ и культуральное исследование для последующей идентификации возбудителей.
Перед началом лабораторного исследования проводился тщательный осмотр пораженных участков, определялся тип онихомикоза, после чего производится забор материала в соответствии с методикой, представленной в разделе 2.1. Полученные пробы исследовались одновременно микроскопически и с использованием культуральных методик, что позволяло точно идентифицировать возбудителей инфекции. За период прохождения преддипломной практики в медицинском учреждении, специализирующемся на проблемах онихомикоза, обратилось около 100 пациентов, что свидетельствует о высокой распространенности данного заболевания.
В ходе выполнения исследований применялось следующее оборудование:
- Лабораторные весы ВЛК-500М, соответствующие ГОСТ 19491-73;
- Дистиллятор БВЭ-2М, согласно ТУ 25-11-911-73;
- Паровой стерилизатор ВК-75 (Россия);
- Сухожаровый шкаф ШСС-80п (Россия);
- Термостат ТС-80-М-2 (Россия, ТУ 25-05-3749-77);
- Бытовой холодильник «Атлант» (Белоруссия);
- Электрическая плитка, соответствующая ГОСТ 14949-83;
- Вытяжной шкаф ШВ-2А-НЖ;
- Микроскоп «Микмед-1» (Россия);
- Лабораторная посуда, пробирки и мерные цилиндры по ГОСТ 1770-74Е и ГОСТ 2092-84;
- Чашки Петри с крышками (ГОСТ 25366-82Е);
- Цифровой фотоаппарат и персональный компьютер;
- Покровные и предметные стекла для микроскопии.
Результаты исследования по половозрастным характеристикам пациентов с различными типами онихомикоза отражены в Таблице 2 и проиллюстрированы на Рисунке 10.
Тип онихомикоза | Мужчины | Женщины | ||||
---|---|---|---|---|---|---|
20-40 лет | 41-50 лет | 51-70 лет | 20-40 лет | 41-50 лет | 51-70 лет | |
Поверхностный | 12 | 40 | 35 | -- | -- | -- |
Дистально-латеральный подногтевой | 0 | 13 | -- | 1 | 3 | 124 |
Проксимальный подногтевой | 00 | 10 | 12 | -- | -- | -- |
Анализ данных свидетельствует о возрастающем уровне встречаемости грибковых поражений с увеличением возраста пациентов, что подтверждается представленными иллюстрациями (Рисунок 10). Приведенные результаты подчеркивают необходимость своевременного проведения лабораторной диагностики с использованием современных методов идентификации возбудителей онихомикоза.
Список литературы
-
– №.
Терещенко А.В. Совершенствование критериев рациональной терапии онихомикозов // Автореф. Дис…. канд. мед. наук. – М. – 2005
- №
Кубонова А.А. Дифференциальная диагностика и лечение кожных и венерических болезней/ А.А., Кубонова, В.Г. Акимов // Атлассправочник. – М.: ООО Медицинское информационное агентство. – 2009 – С. 304
– С. 35-
– №.
– С.
– С. 84-
– Т.
– С. 84-
: 5–9
Халдин А.А. Клинико–этиологическая эффективность 1% спрея Ламизил при лечении грибковых поражений крупных складок кожи / А.А. Халдин, А.А. Цыкин, И.М. Изюмова // Росcийский журнал кожных и венерических болезней. –
– С. 371-
– Т.
- P. 52 -
Глушко Н.И. Грибковые ассоциации при онихомикозах / Н.И. Глушко, С.А Лисовская, В.Р. Паршаков, Н.Ю. Низамова и др. // Успехи медицинской микологии. – М.:
Потекаев Н.Н. Современные представления об этиологии, патогенезе, клиники и терапии онихомикоза / Н.Н. Потекаев, Н.С. Потекаев // Consilium medicum. – 2001 – C. 3 –
Николаевский В. О., Хватов Б. И. Современные представления о микозах стоп //Успехи медицинской микологии. –
– Т.
-Vol.
– С. 167-
– С. 56–
–№
– №
Кубасова Н. Л. Особенности диагностики и лечения онихомикоза, обусловленного недерматомицетами //Пробл. мед. микол. –
– №.
№2 – С. 83 –
Arca E., Saracli M.A.,Akar A., Yildiran S. T., Kurumlu Z., Gur A. R. Polymerase chain reaction in the diagnosis of onychomycosis // Eur. J. Dermatol. –
Степанова Ж.В. Грибковые заболевания стоп // Леч. врач. 2003, – №9, С. 3 – 6
- P. 591-
Bokhari M.A., Hussain I., Jahangir M., Haroon T.S., Aman S., Khurshid K. Onychomycosis in Lahore, Pakistan // Ind. J. Dermatol. -
Корсунская И. М., Панченко А. В. ВЛИЯНИЕ ОНИХОМИКОЗА НА ТЕЧЕНИЕ СОПУТСТВУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ЛИЦ СТАРШЕГО ВОЗРАСТА. ПУТИ РЕШЕНИЯ ПРОБЛЕМЫ //Главный врач Юга России. –
– №.
С. 31 – 34
Соколова Т. В. и др. Дерматофитии стоп: классификация, патогенез и клиника (обзор литературы) //Микология сегодня/под ред. ЮТ Дьякова, АЮ Сергеева. –
– Т.
Сергеев А.Ю. Исследование современной этиологии онихомикоза в России / А.Ю. Сергеев, О.Л. Иванов, Ю.В. Сергеев // Российский журнал кожных и венерических болезней. –
– С.168 –
– №.
– С. 79-85
Пчелин И. М. и др. ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ СЕРИЙНЫХ ИЗОЛЯТОВ ГРИБА TRICHOPHYTONRUBRUM (CASTELLANI)-ВОЗБУДИТЕЛЯ ОНИХОМИКОЗА И МИКОЗА СТОП //Проблемы медицинской микологии. –
.
– №3 –
Сергеев А.Ю. Грибковые инфекции. Руководство для врачей / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев – М.: Издательство БИНОМ – 2008 – №
– Т.
- P.
- №
– С. 480
- Vol. 38, №
– С. 22 –
Сергеев А.Ю. Кандидоз. Природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. – М.: Триада-Х,
– №.
Котрехова Л.П. Особенности течения микозов кожи на современном этапе и их рациональная терапия / Л.П. Котрехова, К.И. Разнатовский, А.А. Вашкевич // Consilium medicum. - №
С.42 –
Bernhardt M. Onychomycosis. Skinmed. – 2015, - May-Jun; 13 (
– С. 60-
Сергеев Ю. В. и др. Аморолфин и современная практика лечения онихомикозов //Иммунопатология, аллергология, инфектология. –
Новоселов В.С. Онихомикозы: состояние проблемы и принципы современной терапии / В.С. Новоселов, Л.Р. Плиева, А.А. Фадеев // Русcкий медицинский журнал Дерматология. –
– №
–
Сологова С. С., Панченко А. В. ОНИХОМИКОЗЫ. ТРУДНОСТИ МЕТОДИКИ ЛЕЧЕНИЯ, ПРИЧИНЫ НЕУДАЧНОГО ЛЕЧЕНИЯ (ОБЗОР) //Главный врач Юга России. –
- №
Сергеев А.Ю. Генодиагностика и новый взгляд на этиологию онихомикозов / А.Ю. Сергеев, Н.Е. Жарикова, В.Ю. Сергеев, С.Н. Щербо, Г.Н. Макова, Ю.В. Сергеев, В.Е. Маликов // Проблемы медицинской микологии. 2006 – Т.
.
- Vol.
– Том 12, №
Потекаев Н.Н. Онихомикоз // Российский медицинский журнал –
– С.
Корнишева В. Г. ОНИХОСКОПИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ОНИХОМИКОЗОВ //Успехи медицинской микологии. –
- Vol.
– С.
С. 128–
Ахмедов Ш. К. и др. СОВРЕМЕННАЯ ОЦЕНКА ЭТИОЛОГИИ, ПАТОГЕНЕЗА, КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗОВ В ВЫБОРЕ РАЦИОНАЛЬНОЙ И ЭФФЕКТИВНОЙ ТЕРАПИИ //www. issledo. ru Редакционная коллегия. –
– Т.
– №.
– С. 138-
Summerbell R.C., Cooper E., Bunn U. and Jamieson F. Onychomycosis: acritical study of techniques and criteria for confirming the etiologic significance of non dermatophytes. //Med. Mycol. -
– С.
– С.
– С. 160-
:
– №. 3 (
Перламутров Ю.Н. Микоз стоп, современные аспекты клиникоэпидемиологических характеристик и лечение / Ю.Н. Перламутров, К.Б. Ольховская // Consilium medicum. –
Васенова В. Ю., Бутов Ю. С. Современные возможности терапии онихомикозов //ДЕРМАТОЛОГИЯ. –
– С. 139-
Scher RK, Baran R. Onychomycosis in clinical practice: factors contributing to recurrence. // Br. J. Dermatol. 2003; 149 (suppl
Кубанова А.А. Руководство по практической микологии / А.А. Кубанова, Н.С. Потекаев, Н.Н. Потекаев // М.,
– С. 139-
Сергеев А.Ю. Онихомикозы: на пути к решению проблемы / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев // Consilium medicum, –
121
Цыкин А.А. Онихомикоз: этиология, диагностика, клиника и лечение / А.А. Цыкин, К.М. Ломоносов // Русский медицинский журнал. –
- P.39 -
Ахмедов Ш. К. и др. СОВРЕМЕННАЯ ОЦЕНКА ЭТИОЛОГИИ, ПАТОГЕНЕЗА, КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗОВ В ВЫБОРЕ РАЦИОНАЛЬНОЙ И ЭФФЕКТИВНОЙ ТЕРАПИИ //www. issledo. ru Редакционная коллегия. –
– С. 60-
– С. 60 –
Соколова Т. В. и др. Дерматофитии стоп: классификация, патогенез и клиника (обзор литературы) //Микология сегодня/под ред. ЮТ Дьякова, АЮ Сергеева. –
Саркисян Э. Ю. ТРАВМА НОГТЕЙ: ЕЩЕ ОДНА ИЗ ПРИЧИН ОНИХОМИКОЗА //Успехи медицинской микологии. –
Сергеев А. Ю. Этиология онихомикозов и принципы оценки данных лабораторной диагностики //Иммунопатология, аллергология, инфектология. –
- P.1277 -
Purim K.S., C. F. Feet dermatophytosis in soccer players // An. Bras. Dermatol. -
Adachi M, Watanabe S. Evaluation of combined deactivators – supplemented agar medium (CDSAM) for recovery of dermatophytes from patients with tinea pedis // Med Mycol. – 2007 –Vol. – Vol.45 – P.
– №. 3 (
Тлиш М. М., Кузнецова Т. Г., Псавок Ф. А. Этиологические особенности онихомикоза в Краснодарском крае. Выбор метода системной терапии //Вестник дерматологии и венерологии. –
Корнишева В. Г. ОНИХОСКОПИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ОНИХОМИКОЗОВ //Успехи медицинской микологии. –
– Т.
– №
Бурова С. А., Привольнев В. В. Онихомикозы: взгляд дерматолога и хирурга //Раны и раневые инфекции. Журнал имени профессора БМ Костючёнка. –
Denning D.W., Evans E.G.V., Kibbler C.C., Richardson M.D., Roberts M.M., Rogers T.R.,Warnock D.W., and Warren R.E. Fungal nail disease: a guide to good practice (report of a Working Group of the British Society for Medical Mycology) // Br. Med.J. -